【請求項１２】

ストレスが組織または細胞培養物における非生理的ストレスを含む、請求項１～１１の いずれか１項記載の方法。

The method of any of claims 1-11, wherein the stress comprises unphysiological stress in tissue or cell culture.

＞＞ここで、初めてストレスについて言及する記載がある。

　明細書段落【００６０】

　細胞をストレスに供しそして／または細胞質もしくはミトコンドリアの一部を細胞から 除去する方法は、致死性の閾値より下で細胞の膜において細孔および／または破裂を引き 起こす任意の環境刺激であり得る。ストレスは、組織または細胞培養物における非生理的 ストレスを含み得る。適切な環境刺激の非限定的な例は、外傷、機械的刺激、化学的曝露 、超音波刺激、酸素欠乏、栄養欠乏、照射、極度な温度への曝露、解離、トリチュレーシ ョン（trituration）、物理的ストレス、高浸透圧、低浸透圧、膜損傷、毒素、極度のイ オン濃度、活性酸素、ＵＶ曝露、強可視光、必須栄養の欠乏、または非生理的酸性環境を 含む。いくつかの実施態様において、１つの環境刺激が細胞に適用され得る。いくつかの 実施態様において、複数の環境刺激が細胞に適用され得、例えば、２つの刺激、３つの刺 激、４つの刺激、またはより多くの刺激が適用され得る。複数の環境刺激を同時にまたは 別々に適用し得る。

　[0084] The method of subjecting the cell to stress and/or removing part of the cytoplasm or mitochondria from a cell can be any environmental stimulus that will cause pores and/or ruptures in the membrane of a cell below the threshold of lethality. The stress may comprise unphysiological stress in tissue or cell culture. Non-limiting examples of suitable environmental stimuli include trauma, mechanical stimuli, chemical exposure, ultrasonic stimulation, oxygen-deprivation, nutrient-deprivation, radiation, exposure to extreme temperatures, dissociation, trituration, physical stress, hyper osmosis, hypo osmosis, membrane damage, toxin, extreme ion concentration, active oxygen, UV exposure, strong visible light, deprivation of essential nutrition, or unphysiologically acidic environment. In some embodiments, one environmental stimulus can be applied to a cell. In some embodiments, multiple environmental stimuli can be applied to a cell, e.g. 2 stimuli, 3 stimuli, 4 stimuli or more stimuli can be applied. Multiple environmental stimuli can be applied concurrently or separately.