MONOZUKI’s blog

STAP細胞にかかわる特許請求の範囲を読む

【請求項61】~【請求項63】

【請求項61】  多能性細胞の自己再生能力を増加させる方法であって、副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)、2iまたは3i培地の存在下で細胞を培養する工程を含む、方法。

61. A method of increasing the self-renewal ability of a pluripotent cell, the method

comprising culturing the cell in the presence of adrenocorticotropic hormone (ACTH), 2i or 3i medium.

 

【請求項62】  細胞が、ACTHを含むLIF培地中で培養される、請求項61記載の方法。

62. The method of claim61, wherein the cell is cultured in LIF medium comprising ACTH.

 

【請求項63】  ACTHが約0.1μM~約100μMの濃度で存在する、請求項61または62記載 の方法。

63. The method of any of claims 61-62, wherein the ACTH is present at a concentration of from about 0.1 μΜ to about 100 μΜ .

 

明細書段落【0139】

 いくつかの実施態様において、ACTHの存在下での培養は、約0.1μM~約1,0 00μM、例えば、約0.1μM~約100μM、約0.1μM~約10μM、または約 10μMを含む細胞培地中で細胞を培養することを含み得る。いくつかの実施態様におい て、ACTHの存在下での細胞の培養は、ACTHを含むLIF培地中で細胞を培養する ことを含み得る。LIF、ACTH、2iおよび3iは、市販されており、そして当該分 野において周知であり、例えば、ACTHをSigma-Aldrichから購入することができ(Cat No. A0673; St. Louis, MO)、そしてLIF培地をMilliporeから購入することができ( 例えばCat Nos ESG1107; Billerica, MA)、そして3iをStem Cells Inc.から購入する ことができる(例えば、"iSTEM Stem Cell Culture Medium, Cat No. SCS-SF-ES-01; New ark, CAとして)。

[00163] In some embodiments, culturing in the presence of ACTH can comprise culturing the cell in a cell medium comprising from about 0.1 μΜ to about 1,000 μΜ, e.g. from about 0.1 μΜ to about 100 μΜ, from about 0.1 μΜ to about 10 μΜ, or about 10 μΜ. In some embodiments, culturing the cell in the presence of ACTH can comprise culturing the cell in LIF medium comprising ACTH. LIF, ACTH, 2i and 3i are commercially available and well known in the art, e.g. ACTH can be purchased from Sigma-Aldrich (Cat No. A0673; St. Louis, MO) and LIF media can be purchased from Millipore (e.g. CatNos ESG1107; Billerica, MA), and 3i can be purchased from Stem Cells Inc. (e.g. as "iSTEM Stem Cell Culture Medium, Cat No. SCS-SF-ES-01; Newark, CA).

 

>>起案日平成29年 2月23日付け拒絶理由通知書で担当審査官は、

引用文献3国際公開第2011/125948号には、ACTHと、FGF受容体阻害剤、MEK活性化阻害剤及びGSK3阻害剤 、すなわち「3i」を含む培地で哺乳動物の内部細胞塊を培養し培養物からES細胞を単離することを含むES細胞の製造方法が記載されており(特に、引用文献3 の請求の範囲,実施例)、同文献にはさらに、培地にLIFを含有させ得る点(請求項4)、ACTHや上記阻害剤がES細胞の増殖を促進し、その多能性を維持し得る 点([0004],[0005],[0013])についても記載されており、ACTH等の添加濃度等といった培養条件は、当業者が適宜設定すべき事項であるので、新規性および進歩性がないと判断している。