【請求項２１】および【請求項２２】

【請求項２１】 　極度な温度への曝露が、３５℃未満または４２℃超の温度に細胞を曝露することを含む 、請求項１３記載の方法。

　 The method of claim 13, wherein the exposure to extreme temperatures comprises exposing the cell to temperatures below 35 °C or above 42°C.

【請求項２２】 　極度な温度への曝露が、凍結以下の温度への細胞の曝露または少なくとも約８５℃の温度への細胞の曝露を含む、請求項２１記載の方法。

　The method of claim 21, wherein the exposure to extreme temperatures comprises exposing the cell to temperatures at, or below freezing or exposure of the cell to temperatures at least about 85°C

＞＞哺乳動物細胞の限定がない段階で、温度範囲を限定しても無意味である。

明細書段落【００７２】

　多能性細胞の生成を誘導する極度な温度への曝露は、低温または高温のいずれかへの曝 露を含み得る。哺乳動物細胞について、極度な低温は、３５℃より低い温度、例えば３４ ℃、３３℃、３２℃、３１℃またはより低い温度であり得る。いくつかの実施態様におい て、極度な低温は、凍結より低い温度であり得る。細胞の凍結は、氷結晶による膜穿孔を 引き起こし得、そして細胞質を低下させるための道を提供する。哺乳動物細胞について、 極度な高温は、４２℃より高い温度、例えば４３℃、４４℃、４５℃、４６℃またはより 高い温度であり得る。いくつかの実施態様において、極度な高温は、約８５℃以上の温度 であり得る。極度な温度下での培養の長さは、２０分間以上、例えば、２０分間、３０分 間、１時間、１２時間、１日間、２日間、１週間、２週間、３週間、１カ月間、２カ月間 またはより長くであり得る。明らかに、温度が高ければ高いほど、多能性細胞の生成を可能にするために一般に許容される曝露は短くなる。

[0096] Exposure to extreme temperatures that induces the generation of pluripotent cells can include exposure to either low temperatures or high temperatures. For a mammalian cell, an extreme low temperature can be a temperature below 35°C, e.g. 34°C, 33°C, 32°C, 31°C, or lower. In some embodiments, an extreme low temperature can be a temperature below freezing. Freezing of cells can cause membrane perforations by ice crystals and provides an avenue for reducing cytoplasm. For a mammalian cell, an extreme high temperature can be a temperature above 42°C, e.g. 43 °C, 44°C, 45°C, 46°C or higher. In some embodiments, the extreme high temperature can be a temperature of about 85°C or higher. The length of culturing under extreme temperatures can be 20 minutes or longer, e.g. 20 minutes, 30 minutes, 1 hour, 12 hours, 1 day, 2 days, 1 week, 2 weeks, 3 weeks, 1 month, 2 months or longer. Clearly, the higher the temperature, the shorter the exposure that will generally be tolerated to permit the generation of pluripotent cells.